伍文定，字時泰，湖北松滋人。他的父親伍當過貴州參議。文定自己考中弘治十二年(1499)進士。他臂力過人，擅長騎馬、射箭，議論事情慷慨激昂。當初做常州推官，辦事精明、勤快，很會斷案，被稱為強干的小吏。魏國公徐亻甫與百姓爭搶田地，文定把田判給了百姓。劉瑾得到徐亻甫送的重禮后，就制造大案，巡撫艾樸以下十四個人都被逮捕了。文定已經升調為成都同知，也被抓進京城的大牢中，結果被罷官為民。劉瑾敗亡以后，他重新起用到嘉興做官。

　　江西姚源的盜賊王浩八等流竄到浙江開化搶劫，都御史俞諫傳令讓文定與參將李隆、都指揮江洪、僉事儲珊一起討伐他，駐軍華埠。而都指揮白弘與湖州知府黃衷另外在馬金扎營。盜賊劉昌三攻破營寨，活捉了白弘，官軍受到了很大打擊。浩八攻打華埠，江洪、文定打敗了他，追到孔埠。李隆、儲珊也追到池淮，破壞了敵人的巢穴，接著又進攻淫田。江洪率奇兵深入敵區，中了盜賊的奸計，與指揮張琳等都被俘。文定等將因為殿后得以生還，盜賊也就此逃回江西去了。俞諫等把文定忠于職責、勇敢作戰的事跡上報朝廷后，朝廷詔令主管部門對他加以獎勵。后來他升任河南知府，設計擒獲了大盜張勇、李文簡。因為才干優裕，能干大事，所以調往吉安。期間又定計平定了永豐和大茅山的盜賊。后來，又幫助巡撫王守仁平定了桶岡、橫水。

　　宸濠叛亂發生后，吉安的百姓、士紳們爭先恐后地逃跑或躲藏。文定把逃亡的斬了一個，群眾才安靜下來。然后他把守仁迎入城中。知府刑王旬、徐璉、戴德孺等先后到來，一起討伐宸濠，由文定當大將。在二十五日那天的戰斗中，文定親身冒著箭頭和滾石的威脅向前，大火燒著胡須也不退后一步。宸濠之亂被平定，他戰功最大，被提升為江西按察使。張忠、許泰到南昌，想頂他的戰功，而守仁已經拿獲宸濠帶到浙江去了。張忠等失望后非常惱恨。文定出來拜見，就把他給綁了。文定罵道“：我不顧誅殺九族為國家平定反賊，有什么罪？你們是天子的心腹，侮辱國家的忠臣義士，為反賊報仇，依法該斬了你們。”張忠更加惱火了，就把文定棰倒在地上。文定后來上書皇帝請求解職，武宗沒有回答他。

　　不久他升任廣東右布政使。尚未赴任，世宗皇帝即位。他上書檢舉張忠等人的罪狀，并且說：“過去張忠、許泰與劉暉到江西來，張忠自稱是天子的弟弟，劉暉自稱天子的兒子，許泰自稱威武副將軍，與天子是同僚。他們侮辱朝廷命官，誣害善良百姓，提出千萬般要求，侵奪了百萬余資財，致使江西到處是餓死的尸首，盜賊洶洶而起。現在即使一刀刀割了他們三個，也不足以向江西百姓謝罪。現今首惡江彬、錢寧都已經法辦了，這三個人實際上是他們的黨羽。請趕快殺了他們，用以顯示法律的威嚴！”又請求把沒收宸濠的資產，發還給江西，作為建設江西的費用；慎重地清理冤案，釋放張忠、許泰所陷害的無罪者，及寧王家族中沒參加陰謀反叛的人員。世宗一并采納了他的建議。

　　評定功績，文定升為右副都御史，負責督辦操江事務。嘉靖三年(1524)討伐海盜，拿獲了董效等二百多人，世宗頒發敕令獎勵了他。不久因病請回家療養去了。六年應召入京，做了兵部右侍郎，冬天升為右都御史，代胡世寧主持都察院的事務。

　　云南的少數族人首領安銓造反，打敗了參政黃昭道，攻占了尋甸、嵩明。第二年，武定的民族首領鳳朝文也起來造反，殺害了同知以下的官吏，與安銓聯合起來包圍云南。世宗詔令加封文定為兵部尚書兼前職，讓他統轄云南、四川、貴州、湖廣的軍隊討伐叛亂者，讓侍郎梁材督理軍餉。正好芒部叛亂酋長沙保的兒子普奴也興兵作亂，朝廷一并交由文定來鎮壓。文定沒到云南，安銓等已經被巡撫歐陽重打敗，于是文定調頭去征伐普奴。左都御史李承勛極力說四川、貴州破缺不堪，不應當再動兵，于是召文定回京提督京營。文定到湖廣，上書請假回家祭祖。過后，四川巡按御史戴金又上書說“：叛賊作亂開始的時候，大勢頭還可以招安。可是文定打定主意要進軍，完全不珍惜機會。大車大馬運輸糧草，白白浪費了幾十萬石。等朝廷詔書命令作罷時，他還不肯停下來。又盡力述說土酋阿濟等的罪過，使得當地軍民紛紛傳言，差一點又出個亂子。我認為文定應當治罪。”尚書方獻夫、李承勛借此詆毀文定好大喜功，勞民傷財，于是命令他退休了。

　　文定以忠臣義士自相期許，遇到事情，敢想敢干，不與時俯仰，見風使舵。芒部叛亂一事，他恨那些小丑們幾次造反，反復無定，所以想為國家弘揚威武，卻被議事的大臣們從旁給阻撓了。當時朝廷一心要姑息偷安，因此他沒能成就這樁功業。九年(1530)七月他死在家中。天啟初，才被追謚為“忠襄”。

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